精选文献因RPE65突变引起的儿童期发病

原文来源：《柳叶刀杂志》

摘要

背景

在一项剂量递增的第1期的研究中，对于由RPE65突变引起的遗传性视网膜营养不良，含有RPE65基因（AAV2-hRPE65v2）的重组腺相关病毒（AAV）载体进行单侧视网膜下注射已经显示出安全性和有效性。这一发现，以及该疾病的双重性质和预期治疗，促使我们确定参与阶段1研究的患者的对侧眼AAV2-hRPE65v2的使用安全性。

方法

在后续的第1期试验中，将总体积为微升的一个剂量的AAV2-hRPE65v2（1.5×10e11载体基因组）在视网膜下注射到11名儿童和成人（在第二次给药时年龄11-46岁）的对侧眼中，这些患者之前未注射过，这些患者是由于RPE65基因突变引起的遗传性视网膜营养不良，初次视网膜下注射后持续了1.71-4.58年。研究人员评估了安全性，免疫反应，视网膜和视觉功能，以及从基线至3年随访时视觉皮质的激活，观察正在进行中。本研究已在ClinicalTrials.gov注册，编号NCT。

发现

没有报道与AAV相关的不良事件，与手术相关的不良事件多为轻度的（3例患者发生陷凹，2例患者发生白内障）。一名患者发展为细菌性眼内炎，被排除在分析之外。我们注意到，大多数无显著免疫原性的患者疗效有所改善。与基线相比，10名参与者的汇总分析显示，在第30天持续至第3年的注射眼的平均迁移率和全视野光敏感度有改善（迁移率p=0.，白光全视野灵敏度p0.），但是在同一时间段，在先前注射的眼中未观察到显著变化（迁移率p=0.，白光全视野灵敏度p=0.）。第二只眼或以前注射的眼，在汇集分析中，从基线到第3年时视敏度的变化不显著（与基线相比的所有时间点P0.49）。

解释

据我们所知，AAV2-hRPE65v2是使用至对侧眼的第一次成功的基因治疗。结果强调一些措施的使用，可帮助描述基因增强疗法对这种疾病产生极大益处的变量。

介绍

编码全反式视黄酯异构酶RPE65基因的双等位基因突变，这是维生素A循环中至关重要的酶——导致莱伯氏先天性黑蒙2型和其他形式的严重视网膜退行性疾病。1-4对由RPE65基因突变引起的疾病的重组腺相关病毒基因增强疗法原理的证明建立在犬和小鼠模型中，并且这些研究结果5-8表明，由RPE65缺陷导致的视觉循环的生物化学阻断可能被克服。临床试验9-11是在大型动物的药效、安全性和剂量研究之后开始的。

医院（美国宾夕法尼亚州费城）的第一阶段研究10.12-14结果显示，全部12例患者的视网膜和视觉功能均得到安全稳定的改善。这些个体在剂量递增研究中，单方面视网膜下注射其视力更差的非优势眼，其注射剂量范围为1.5×到1.5×个AAV2-hRPE65v2载体基因组，携带野生型RPE65cDNA的AAV载体。10.12大多数参与者的光敏度改善，导航能力增强，视力提高，视觉皮层的激活增加，以及改善其注射眼视觉途径的功能和结构。15患者在未注射眼睛中也有获得性传入性瞳孔缺陷，表明注射的（但不是未注射眼）视网膜已通过基因治疗进行了校正。10.12-15

研究背景

本研究前的证据：

年3月24日，我们检索了在年1月1日至年1月1日期间的PubMed英文刊物，单独使用和组合使用以下术语：“视网膜”，“基因治疗”，“AAV”，“相关病毒“RPE65”，“临床试验”，“再次给药”，“两次给药”，“再给药”，“疫苗”和“免疫应答”。多个剂量递增研究测试了由RPE65突变引起的视网膜营养不良的基因增强治疗。虽然各方面的改进（视力，视野，瞳孔光反射，全视野光敏感度和导航能力）已有报道，但是没有一项试验对腺相关病毒（AAV）载体对侧眼治疗的安全性进行评估，即使RPE65突变引起双侧疾病。此外，影响视网膜和视功能改善的变量尚未明确定义。由于免疫清除，在任何器官中重复给予AAV载体后，几乎没有报道成功的案例。因此，需要进一步测试第二次给药的安全性和有效性。

本研究的附加价值：

据我们所知，我们的研究是第一个成功地进行对侧眼基因治疗的研究。我们表明，在先前暴露于具有RPE65视网膜病变的个体中的AAV2-hRPE65v2之后，即使在具有对AAV2的预先存在的免疫力的患者中，第二只眼的给药也是安全的。重复给药可持久改善功能性视力、视网膜和视觉功能，以及皮质反应。安全有效地将AAV注射到对侧视网膜的能力为视力障碍得患者提供了进一步增加视觉功能的机会。

所有可获得的证据启示：

我们的研究结果支持进行涉及双眼治疗（使用我们研究中的试剂，剂量和体积）的3期AAV2基因治疗研究，以及使用几种不同的结果测量方法。这一结果也为其他眼部基因治疗研究中的第二只眼睛的谨慎治疗铺平了道路，尽管在某些情况下，将未治疗的第二只眼睛保持为内部控制是可取的。

单侧注射成功后，我们假设通过将AAV2-hRPE65v2递送到对侧、原本视力较好的眼睛，可以进一步改善功能视力和视网膜和视觉功能。主要